Técnicas de Biologia Molecular

Objetivos

A compreensão dos fundamentos teóricos das principais técnicas da biologia molecular, o emprego de técnicas de biologia molecular tanto no campo de pesquisa básica como na pesquisa aplicada, o reconhecimento da sua importância no estudo da variabilidade genética são meios imprescindíveis a todos aqueles que planeiam trabalhar na investigação quer na biologia molecular quer na genética molecular, e importante para o profissional biólogo em geral. São objetivos de aprendizagem desta disciplina:

1. Conhecer conceitos básicos e terminologias das principais técnicas da biologia molecular.

2. Descrever e compreender a aplicabilidade das principais técnicas de biologia molecular.

3. Executar as técnicas básicas de deteção e de análise de proteínas e de ácidos nucleicos, por forma abranger diversos níveis duma investigação em biologia molecular e genética.

4. Recolher e correlacionar a informação obtida e saber apresentar sob forma de relatório científico.

Programa

O conteúdo programático da disciplina está dividido por temas a desenvolver por uma ou mais aulas:

1. Cuidados gerais a ter na realização das práticas laboratoriais em biologia molecular

2. Familiarização com o equipamento básico e técnicas a utilizar

3. Descrição de polimorfismo genético de proteínas através de técnicas de eletroforese (SGE, AGE e IEF)

4. Métodos de extração de DNA (utilização de diferentes protocolos)

5. Eletroforese de DNA em gel de agarose

6. Reação em cadeia da Polimerase (PCR). Amplificação do DNA através da técnica de PCR

7. Restrição do DNA amplificado (uso de enzimas de restrição)

8. Informatividade e aplicação dos vários tipos de marcadores genéticos moleculares

9. Sequenciação de DNA (leitura de géis de sequenciação)

10. Outras técnicas de Biologia Molecular

Métodos de Ensino

Em cada aula de TBM a hora teórico-prática é de carácter expositivo com projeção de slides que introduzirá o tema a ser desenvolvido durante a aula, apresentará o método e a técnica aplicar na parte prática. A componente laboratorial abrangerá uma série de experiências a desenvolver pelos alunos, organizados em grupos, mediante o fornecimento de protocolos. Durante a realização das experiências serão apresentados e discutidos os conceitos básicos e termos relacionados com as técnicas de biologia molecular. A primeira aula prática será integralmente dedicada ao manuseamento do equipamento básico a utilizar nas aulas seguintes. No início das aulas será dado indicações sobre a bibliografia adequada e de como efetuar pesquisas sobre os temas.

Bibliografia

Bartlett J.M.S. & Stirling D., 2003. PCR Protocols, 2nd Ed., Humana Press, New Jersey.

Hartl D. & Jones E.W., 2009. Genetics. Analysis of genes and genomes, 9th Ed., Jones and Bartlett Publishers, Boston.

Lima N. & Mota M. (Ed), 2003. Biotecnologia: fundamentos e aplicações. Lidel – Edições Técnicas, Lda., Lisboa.

Ausubel F. M., et. al. (Ed), 2002. Short protocols in molecular biology: a compendium of methods from current protocols in molecular biology, 5th Ed. (2 volumes), John Wiley & Sons, Inc., New Jersey.

Tagu D. & Moussard C., 2006. Techniques for molecular biology. Taylor and Francis Group, Science Publishers, New Hampshire.

Watson J.D., Baker T.A., Bell S.P. & Gann A., 2008. Molecular Biology of the gene, 5th Ed., Pearson Benjamin Cummings.

Winfrey M.R., Rott M.A. & Wortman A.T., 1997. Unraveling DNA: molecular biology for the laboratory. Prentice Hall, Inc., New Jersey.

Método de Avaliação

• Apresentação oral sobre um tema ou artigo selecionado - 25 %
• Frequência - 50 %
• Relatório científico sobre um dos temas desenvolvidos durante as aulas - 25 %